为了生物及医药方面研究的需要，研究者常需制备脂蛋白纯品，采用的方法有超速离心法、化学沉淀法(如硫酸右旋糖苷沉淀法)、凝胶过滤和高压液相层析法等。迄今为止，采用密度梯度超速离心分离纯化各种脂蛋白仍是纯度较高、简便实用的好方法。
超速离心法可分为制备型和分析型两种，制备型密度梯度离心法可以分为等密度离心法和速率一区带密度梯度离心法，可以选用的转头有角头、甩平头、垂直头和区带头。我们介绍的方法利用不同容量的角式转头及简单配制的梯度液，在各种型号的超速离心机上快速分离血清脂蛋白，可以得到满意的分离效果。
一材料和仪器
1梯度液
A液：11．40gNaC1，0．1gEDTA—Na2，置于1000rnl量筒中，加入500ml重蒸水及1ml1NNaOH，混匀至全部溶解。加重蒸水至1000ml最后再加3rI1l重蒸水(NaCI：0．195mo1)。终密度1．O06g／cm~，pH10．37。
B液：力Ⅱ24．98gNaBr至U100mlA液中(NaC1：0．195mol，NaBr：2．44mo1)。终密度1．182g／cm3，pH9．72。
C液：加78．32gNaBr到100mlA液中(NaC1：0．195mol，NaBr：7．65mo1)。终密度1．478g／cm3，pH8．86。
2离心机、转头、离心管
(1)离心机：HitachiCP—MX系列超速离心机或其他类似机组。
HitachiCS一150GXL微量超速离心机(2)转头和离心管：S140AT：140，000rpm，l，050，000×g，10×2ml，K=5，1PC厚壁管。S80AT3：80，000rpm，415，000×g，8×8ml，K=23，6PC厚壁管。S70AT：70，000rpm，505，000×g，8×40ml，K=44，40PA管。
二,离心操作
1血浆一血球分离
全血，角转头或甩平转头3000rpm×20min，沉淀为血细胞，上清血浆待用。
2乳糜微粒分离
离心参数：各种转头均可用，4×106(g×min)，10℃。
梯度液：离心管下部3／4容积为血浆，上部1／4容积为0．15MNaCl+0．3MEDTA，pH7．4。离心结果：乳糜微粒上浮，离心管倾斜，吸管贴管壁慢吸出(约占血浆容积的2％一6％)。
注意：禁食12h以上供血者血浆中乳糜微粒含量很低，餐后供血者含量较高。
以往文献报道的密度梯度离心法常常指定离心机和转头，提供的方法不能推广，且需要进行精确到小数点后4位的密度标定，过程繁琐。我们采用等密度梯度分离，梯度液的配置简便可行，不需要做密度测定或光折射率的换算。几乎所有的超速离心机用户都有角式转头，不论机型，均可参照本法用于离心分离脂蛋白，用户只需根据所需容量灵活调整梯度液和样品的量，并计算出离心时间即可。对大量样品还可用同样方法、同样梯度液进行区带分离。本法分离出的VLDL、LDL、HDL还可以进一步用长离心管缩小不连续梯度密度差，分离出其亚组分。需要注意配置梯度液时室温应接近离心温度，所用试剂最好达到分析纯级。